آیا می توان از یک نیمکت تمیز برای کشت سلول استفاده کرد؟
کشت سلولی یک روش اساسی در تحقیقات بیولوژیکی ، بیوتکنولوژی و توسعه دارویی است. این شامل رشد و نگهداری سلول ها در یک محیط کنترل شده در خارج از زیستگاه طبیعی آنها است. یک محیط تمیز برای کشت سلول موفق برای جلوگیری از آلودگی و اطمینان از یکپارچگی خطوط سلولی بسیار مهم است. یک قطعه تجهیزات که اغلب برای ایجاد یک محیط تمیز مورد توجه قرار می گیرد ، نیمکت تمیز است. به عنوان یک تأمین کننده نیمکت تمیز ، از من سؤال می شود که آیا می توان از یک نیمکت تمیز برای کشت سلولی استفاده کرد. در این پست وبلاگ ، من این سؤال را با جزئیات بررسی خواهم کرد.
درک نیمکت های تمیز
نیمکت های تمیز ، که به عنوان کابینت های جریان چند لایه نیز شناخته می شوند ، به گونه ای طراحی شده اند که با هدایت هوای فیلتر شده بر روی سطح کار ، محیط کار تمیز را فراهم می کنند. دو نوع اصلی از نیمکت تمیز وجود دارد: جریان لامینار افقی و عمودی. در یک نیمکت تمیز جریان لامینار افقی ، هوای تصفیه شده به صورت افقی در سطح کار از پشت نیمکت به سمت اپراتور جریان می یابد. در یک نیمکت تمیز لامینار عمودی ، هوای فیلتر شده به صورت عمودی به سمت پایین روی سطح کار جریان می یابد.
عملکرد اصلی یک نیمکت تمیز محافظت از کار در برابر آلودگی ذرات است. هوای داخل نیمکت تمیز از طریق فیلترهای هوای ذرات با راندمان بالا (HEPA) یا فیلترهای Ultra - کم نفوذ (ULPA) منتقل می شود ، که می تواند ذرات را به اندازه 0.3 میکرومتر با راندمان بالا (معمولاً 99.97 ٪ یا بالاتر) از بین ببرد. این یک محیط کلاس 100 (ISO 5) یا محیط تمیز بهتر را در نیمکت ایجاد می کند ، به این معنی که در هر فوت مکعب بیش از 100 ذره وجود ندارد که 0.5 میکرومتر یا اندازه بزرگتر باشد.
مورد نیاز برای کشت سلولی
کشت سلولی برای حمایت از رشد سلول و جلوگیری از آلودگی به یک محیط بسیار کنترل شده نیاز دارد. الزامات کلیدی عبارتند از:
- عقیم: سلولها در معرض آلودگی باکتری ها ، قارچ ها ، ویروس ها و سایر میکروارگانیسم ها بسیار مستعد هستند. هرگونه آلودگی می تواند منجر به مرگ سلول ها ، نتایج تجربی نادرست و از بین رفتن رده های سلولی ارزشمند شود.
- کنترل دما و رطوبت: بیشتر سلولهای پستانداران در دمای 37 درجه سانتیگراد و رطوبت نسبی حدود 95 ٪ کشت داده می شوند. حفظ این شرایط برای زنده ماندن و رشد سلول ضروری است.
- ترکیب گاز: سلول ها به یک ترکیب گاز خاص ، به طور معمول ترکیبی از اکسیژن و دی اکسید کربن نیاز دارند. برای سلولهای پستانداران ، از یک جو 5 ٪ CO₂ معمولاً برای حفظ pH محیط کشت استفاده می شود.
- تغذیه مغذی: سلولها به یک محیط کشت مناسب نیاز دارند که مواد مغذی اساسی مانند اسیدهای آمینه ، ویتامین ها ، مواد معدنی و فاکتورهای رشد را فراهم می کند.
استفاده از یک نیمکت تمیز برای کشت سلول
یک نیمکت تمیز می تواند نقش مهمی در کشت سلولی داشته باشد ، اما مزایا و محدودیت هایی نیز دارد.
مزایا
-
پیشگیری از آلودگی: اصلی ترین مزیت استفاده از یک نیمکت تمیز برای کشت سلول ، توانایی آن در تأمین محیط تمیز است. هوای فیلتر شده در نیمکت تمیز به به حداقل رساندن معرفی ذرات موجود در هوا و میکروارگانیسم ها ، کاهش خطر آلودگی در طی مراحل رسیدگی به سلول مانند تغییرات رسانه ای ، عبور سلول و تهیه نمونه کمک می کند.
-
حفاظت از عملگر: علاوه بر محافظت از سلول ها ، یک نیمکت تمیز همچنین سطح محافظت از اپراتور را فراهم می کند. جریان چند لایه هوا می تواند از شیوع ذرات معلق در هوا در طی روشهای کشت سلولی جلوگیری کند و خطر قرار گرفتن در معرض مواد بیولوژیکی بالقوه خطرناک را کاهش می دهد.
-
تطبیق پذیری: نیمکت های تمیز برای تنظیم نسبتاً آسان هستند و می توانند در انواع تنظیمات آزمایشگاهی مورد استفاده قرار گیرند. آنها برای هر دو عملیات کشت سلولی در مقیاس کوچک و بزرگ مناسب هستند و آنها را برای بسیاری از آزمایشگاه های تحقیقاتی انتخابی محبوب می کنند.
محدودیت ها
- کمبود دما ، رطوبت و کنترل گاز: یکی از مهمترین محدودیت های یک نیمکت تمیز این است که کنترل دما ، رطوبت یا ترکیب گاز را فراهم نمی کند. سلولهای کشت شده در یک نیمکت تمیز در معرض شرایط آزمایشگاهی محیط قرار می گیرند که ممکن است برای رشد سلول بهینه نباشد. به عنوان مثال ، اگر دمای آزمایشگاهی خیلی کم یا خیلی زیاد باشد ، می تواند بر متابولیسم سلولی و زنده ماندن تأثیر بگذارد. به طور مشابه ، بدون رطوبت مناسب و کنترل گاز ، pH محیط کشت ممکن است تغییر کند و منجر به استرس سلولی یا مرگ شود.
- استریلیت محدود: در حالی که یک نیمکت تمیز می تواند خطر آلودگی هوا را کاهش دهد ، اما خطر آلودگی منابع دیگر را به طور کامل از بین نمی برد. به عنوان مثال ، سطوح نیمکت و تجهیزات مورد استفاده در داخل نیمکت باید قبل از هر بار استفاده به درستی استریل شود. اگر اینگونه نباشد ، آنها می توانند به عنوان منبع آلودگی عمل کنند. همچنین ، دست و لباس اپراتور می تواند میکروارگانیسم ها را حمل کند ، و برای جلوگیری از آلودگی باید تکنیک های مناسب آسپتیک دنبال شود.
تجهیزات مکمل
برای غلبه بر محدودیت های یک نیمکت تمیز در کشت سلولی ، استفاده از تجهیزات مکمل اغلب لازم است.
-
انکوباتور: انکوباتورها برای تأمین دما ، رطوبت و ترکیب گاز بهینه برای کشت سلول ضروری هستند. سلولها را می توان پس از دست زدن به نیمکت تمیز به انکوباتور منتقل کرد تا رشد و نگهداری امکان پذیر باشد. انواع مختلف انکوباتور در دسترس است ، مانند انکوباتورهای Co₂ و انکوباتورهای هیپوکسیک ، که می توانند بر اساس الزامات خاص خطوط سلولی انتخاب شوند.
-
اتوکلاو و استریلیزرها: اتوکلاو و استریلیزرها برای استریل کردن تجهیزات ، رسانه ها و سایر مواد مورد استفاده در کشت سلولی استفاده می شوند. با اطمینان از اینکه تمام مواد به درستی استریل شده اند ، می توان خطر آلودگی را بیشتر کاهش داد.
-
سیستم نظارت بر ذرات گرد و غبار آنلاین: از این سیستم می توان برای نظارت مداوم غلظت ذرات در داخل نیمکت تمیز و محیط اطراف استفاده کرد. با تشخیص هرگونه افزایش در سطح ذرات ، می تواند اپراتور را نسبت به خطرات آلودگی احتمالی هشدار دهد و اقدامات اصلاحی به موقع را فراهم کند.
سایر تجهیزات اتاق تمیز برای کشت سلولی
علاوه بر نیمکت های تمیز ، تجهیزات تمیز دیگری نیز وجود دارد که می تواند در امکانات کشت سلولی برای تقویت پاکیزگی و ایمنی کلی محیط استفاده شود.
- اتاق تمیز FFU: از واحدهای فیلتر فن (FFU) برای تأمین منبع ثابت هوای فیلتر شده در اتاق های تمیز استفاده می شود. آنها را می توان در سقف یا دیواره های یک مرکز کشت سلولی برای حفظ یک محیط هوای تمیز و یکنواخت نصب کرد.
- دوش غبار اتاق تمیز: از دوش غبار تمیز می توان برای از بین بردن آلودگی های سطح از پرسنل و تجهیزات قبل از ورود به اتاق تمیز استفاده کرد. این امر به جلوگیری از ورود آلاینده ها به منطقه کشت سلول کمک می کند.
پایان
در نتیجه ، یک نیمکت تمیز می تواند برای کشت سلول استفاده شود ، اما این یک راه حل مستقل نیست. این یک محیط کار تمیز را فراهم می کند که می تواند خطر آلودگی هوا را در طی مراحل کار با سلول کاهش دهد. با این حال ، به دلیل عدم دما ، رطوبت و کنترل گاز ، باید در رابطه با سایر تجهیزات مانند انکوباتور ، اتوکلاو و سیستم های نظارتی مورد استفاده قرار گیرد.
اگر درگیر کشت سلولی هستید و به دنبال یک نیمکت تمیز قابل اعتماد یا سایر تجهیزات تمیز هستید ، ما برای کمک به اینجا هستیم. شرکت ما طیف گسترده ای از نیمکت های تمیز و با کیفیت بالا و محصولات مرتبط را ارائه می دهد که برای پاسخگویی به نیازهای کاربردهای مختلف کشت سلولی طراحی شده اند. این که آیا شما یک آزمایشگاه تحقیقاتی کوچک هستید و چه یک شرکت بزرگ در مقیاس بیوتکنولوژی ، ما می توانیم راه حل های مناسب را در اختیار شما قرار دهیم. برای بحث در مورد نیازهای خود با ما تماس بگیرید و امروز مذاکره تهیه را آغاز کنید.
منابع
- Freshney ، RI (2010). کشت سلولهای حیوانی: کتابچه راهنمای تکنیک اساسی و کاربردهای تخصصی. ویلی - لیس.
- Pollard ، JW ، & Walker ، JM (2017). پروتکل های اساسی کشت سلول. Humana Press.
- ISO 14644 - 1: 2015. اتاق های تمیز و محیط های کنترل شده مرتبط - قسمت 1: طبقه بندی پاکیزگی هوا.